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江口蘿卜豬(zhu)UCP3 基因變異及其(qi)表達(dá)(da)量與肉質(zhì)性(xing)狀關(guān)聯(lián)性分析(xi)
? ? ? 解耦(ou)聯(lián)蛋白(uncoupling protein, UCPs)是線(xian)粒體上的(de)質(zhì)子載體(ti),以質(zhì)子漏(lou)方式(shi)把H+從(cong)外膜傳遞到(dao)內(nèi)膜(mo)(Ricquier, Frédéric, 2000)。在氧(yang)化磷酸(suan)化過(guò)程中,可(ke)以降低膜內(nèi)外(wai)的電(dian)化學(xué)梯度,在(zai)電子傳(chuan)遞過(guò)(guo)程中實(shí)現(xiàn)質(zhì)(zhi)子回流,從(cong)而起(qi)到讓呼吸鏈與(yu)ATP合成過(guò)(guo)程解耦聯(lián)的作(zuo)用,使能(neng)量以(yi)熱能的形(xing)式散發(fā),氧(yang)化磷酸(suan)化合成ATP 的(de)效率(lv)下降(jiang)(張雷等, 2010)。UCP3 基因是(shi)UCPs 家族成員之一(yi),與UCP2 基因緊(jin)密連鎖并(bing)定位于豬的(de)9 號(hào)染色體(Stone et al.,2015)。當(dāng)(dang)受到(dao)脂肪酸(suan)刺激時(shí),UCP3 基因表(biao)達(dá)量上調(diào),且UCP3 蛋(dan)白參與脂(zhi)肪酸和其(qi)他陰(yin)離子(zi)跨膜(mo)轉(zhuǎn)運(yùn)(Lapice et al., 2017)。UCP3 活性(xing)對(duì)脂(zhi)肪酸氧化和氨(an)基酸代謝及其(qi)相關(guān)的生化(hua)途徑(jing)具有重(zhong)要調(diào)節(jié)作(zuo)用(Aguer et al., 2016)。所(suo)以,很多(duo)畜禽研(yan)究者將其作(zuo)為一個(gè)影響(xiang)肉品質(zhì)的重要(yao)功能(neng)候選基因(yin)展開(kāi)研究。方美(mei)英等(2002)在對(duì)(dui)豬(Sus scrofa) UCP3 基因多(duo)態(tài)性的研(yan)究中,在內(nèi)含(han)子3 發(fā)現(xiàn)了T272G變異(yi)位點(diǎn)。李艷華等(deng)(2006)分析了長(zhǎng)白(bai)豬、杜(du)洛克等5個(gè)(ge)國(guó)內(nèi)外豬種(zhong)UCP3 基因的多(duo)態(tài)位點(diǎn),發(fā)現(xiàn)(xian)位于啟動(dòng)子區(qū)(qu)的SNPs位點(diǎn)會(huì)造(zao)成轉(zhuǎn)(zhuan)錄因(yin)子結(jié)合位點(diǎn)的(de)改變,影響對(duì)(dui)UCP3 基因的(de)轉(zhuǎn)錄和調(diào)控(kong),從而影響豬(zhu)的生產(chǎn)性(xing)能。陳(chen)哲(2011)在UCP3 基因cDNA上檢(jian)測(cè)到A448G突變(bian)位點(diǎn),并發(fā)現(xiàn)該(gai)位點(diǎn)等(deng)位基因A對(duì)于(yu)改善豬脂肪性(xing)狀具(ju)有積(ji)極作用。王陽(yáng)(yang)等(2011)研究發(fā)現(xiàn)(xian)UCP3 參與豬骨骼(ge)肌細(xì)胞脂肪代(dai)謝的(de)調(diào)節(jié)(jie),從而影響(xiang)地方豬種(zhong)的肉質(zhì)(zhi)和其他性狀(zhuang)。但是關(guān)(guan)于UCP3 基(ji)因表達(dá)量(liang)與肉質(zhì)(zhi)性能之(zhi)間的相關(guān)(guan)性尚(shang)未見(jiàn)研究(jiu)報(bào)道(dao)。
? ? ? 本研究以貴州(zhou)優(yōu)良地(di)方品種江口(kou)蘿卜豬為(wei)實(shí)驗(yàn)材料(liao),屠宰后(hou)測(cè)定其(qi)11 項(xiàng)主要(yao)肉質(zhì)性能(neng)指標(biāo),并(bing)提取背最長(zhǎng)(zhang)肌中的(de)基因(yin)組DNA建(jian)立混合DNA池,擴(kuò)增(zeng)UCP3 基因全(quan)部外(wai)顯子并測(cè)序,初(chu)步篩選多(duo)態(tài)位(wei)點(diǎn),然后以(yi)單個(gè)(ge)樣本DNA為(wei)模板,擴(kuò)增(zeng)篩選到的(de)位點(diǎn)對(duì)(dui)應(yīng)外(wai)顯子(zi),用以測(cè)序(xu)驗(yàn)證并分(fen)型。對(duì)應(yīng)肉質(zhì)指(zhi)標(biāo),對(duì)不同基(ji)因型豬進(jìn)行(xing)肉質(zhì)(zhi)性能差異分析(xi)。提取背最長(zhǎng)(zhang)肌總RNA,檢測(cè)不(bu)同基(ji)因型江口蘿卜(bo)豬背最長(zhǎng)(zhang)肌中UCP3 基因的(de)平均表(biao)達(dá)量做差異顯(xian)著性分析,分(fen)析基(ji)因型、表達(dá)量與(yu)及肉(rou)質(zhì)性能(neng)三者之(zhi)間的(de)關(guān)聯(lián)性(xing),以期探尋UCP3 基(ji)因多(duo)態(tài)性(xing)對(duì)江(jiang)口蘿(luo)卜豬肉(rou)質(zhì)性(xing)能的影響,為科(ke)學(xué)的選(xuan)種選(xuan)育提供基(ji)礎(chǔ)材料。
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