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江口蘿卜(bo)豬UCP3 基因變(bian)異及(ji)其表達(dá)量與肉(rou)質(zhì)性狀(zhuang)關(guān)聯(lián)(lian)性分析
? ? ? 解耦聯(lián)(lian)蛋白(bai)(uncoupling protein, UCPs)是線粒體上(shang)的質(zhì)子(zi)載體,以(yi)質(zhì)子漏方(fang)式把H+從外膜傳(chuan)遞到(dao)內(nèi)膜(Ricquier, Frédéric, 2000)。在氧化(hua)磷酸化過(guo)程中,可以降低(di)膜內(nèi)外的電(dian)化學(xué)梯度,在電(dian)子傳遞過程(cheng)中實(shí)現(xiàn)(xian)質(zhì)子回(hui)流,從而起到讓(rang)呼吸鏈(lian)與ATP合成過程(cheng)解耦聯(lián)(lian)的作(zuo)用,使能(neng)量以熱能的(de)形式散(san)發(fā),氧(yang)化磷酸化合成(cheng)ATP 的效率下(xia)降(張雷(lei)等, 2010)。UCP3 基因是UCPs 家(jia)族成員(yuan)之一,與UCP2 基因(yin)緊密連鎖并(bing)定位于豬的9 號(hao)染色體(Stone et al.,2015)。當(dāng)受到(dao)脂肪酸刺激時(shi),UCP3 基因表達(dá)(da)量上調(diào),且UCP3 蛋白(bai)參與(yu)脂肪(fang)酸和其他陰離(li)子跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)(yun)(Lapice et al., 2017)。UCP3 活性對脂肪(fang)酸氧化和(he)氨基(ji)酸代謝(xie)及其相關(guān)(guan)的生化途徑(jing)具有重要(yao)調(diào)節(jié)(jie)作用(Aguer et al., 2016)。所以,很多(duo)畜禽研究者(zhe)將其作(zuo)為一個影響肉(rou)品質(zhì)的(de)重要功(gong)能候(hou)選基因展開(kai)研究。方美(mei)英等(2002)在(zai)對豬(Sus scrofa) UCP3 基因多態(tài)(tai)性的研究中,在(zai)內(nèi)含(han)子3 發(fā)現(xiàn)了(le)T272G變異位點(diǎn)。李(li)艷華等(2006)分(fen)析了長白豬、杜(du)洛克(ke)等5個國內(nèi)(nei)外豬種UCP3 基因的(de)多態(tài)位點(diǎn),發(fā)(fa)現(xiàn)位于啟動(dong)子區(qū)的SNPs位點(diǎn)(dian)會造成(cheng)轉(zhuǎn)錄因子(zi)結(jié)合(he)位點(diǎn)的(de)改變(bian),影響對UCP3 基因的(de)轉(zhuǎn)錄和調(diào)控,從(cong)而影響(xiang)豬的生產(chǎn)性能(neng)。陳哲(2011)在UCP3 基因cDNA上(shang)檢測到(dao)A448G突變(bian)位點(diǎn),并(bing)發(fā)現(xiàn)該位(wei)點(diǎn)等位基(ji)因A對于改善豬(zhu)脂肪性狀具有(you)積極作用。王(wang)陽等(2011)研究(jiu)發(fā)現(xiàn)UCP3 參與豬(zhu)骨骼肌(ji)細(xì)胞脂(zhi)肪代謝的(de)調(diào)節(jié),從而影響(xiang)地方(fang)豬種的肉(rou)質(zhì)和其他性狀(zhuang)。但是關(guān)于(yu)UCP3 基因表達(dá)(da)量與肉質(zhì)性(xing)能之(zhi)間的相關(guān)性(xing)尚未見研(yan)究報道。
? ? ? 本研究以貴(gui)州優(yōu)良地方品(pin)種江口蘿卜(bo)豬為實(shí)驗(yàn)(yan)材料,屠宰后測(ce)定其(qi)11 項(xiàng)主要肉質(zhì)(zhi)性能指標(biāo),并提(ti)取背最長(zhang)肌中的(de)基因組DNA建立混(hun)合DNA池,擴(kuò)(kuo)增UCP3 基因(yin)全部外顯子(zi)并測(ce)序,初步篩(shai)選多態(tài)(tai)位點(diǎn),然后以單(dan)個樣(yang)本DNA為模板,擴(kuò)(kuo)增篩(shai)選到的位點(diǎn)(dian)對應(yīng)(ying)外顯(xian)子,用以測(ce)序驗(yàn)證并(bing)分型。對應(yīng)肉質(zhì)(zhi)指標(biāo)(biao),對不(bu)同基(ji)因型豬進(jìn)行(xing)肉質(zhì)性能差(cha)異分(fen)析。提取背最(zui)長肌(ji)總RNA,檢測不(bu)同基因型江(jiang)口蘿卜豬背最(zui)長肌(ji)中UCP3 基(ji)因的平均表達(dá)(da)量做差異(yi)顯著性(xing)分析,分析基(ji)因型、表達(dá)量與(yu)及肉(rou)質(zhì)性(xing)能三者之(zhi)間的(de)關(guān)聯(lián)性(xing),以期(qi)探尋(xun)UCP3 基因多態(tài)性對(dui)江口蘿(luo)卜豬肉(rou)質(zhì)性能的(de)影響,為(wei)科學(xué)(xue)的選種選(xuan)育提供基(ji)礎(chǔ)材料。
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