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江口蘿卜豬(zhu)UCP3 基因變異及(ji)其表達(dá)量(liang)與肉(rou)質(zhì)性狀(zhuang)關(guān)聯(lián)性分(fen)析
? ? ? 解耦聯(lián)蛋白(uncoupling protein, UCPs)是(shi)線粒體(ti)上的質(zhì)子(zi)載體,以質(zhì)子(zi)漏方式把(ba)H+從外膜傳(chuan)遞到內(nèi)膜(Ricquier, Frédéric, 2000)。在氧(yang)化磷酸化過(guò)(guo)程中,可以降低(di)膜內(nèi)外的電(dian)化學(xué)梯度,在電(dian)子傳遞(di)過(guò)程中實(shí)現(xiàn)質(zhì)(zhi)子回流,從而(er)起到讓(rang)呼吸鏈與ATP合成(cheng)過(guò)程解耦聯(lián)(lian)的作用,使能(neng)量以熱能(neng)的形式散發(fā),氧(yang)化磷(lin)酸化合(he)成ATP 的效率下降(jiang)(張雷(lei)等, 2010)。UCP3 基(ji)因是UCPs 家族(zu)成員之(zhi)一,與UCP2 基因(yin)緊密連鎖并定(ding)位于豬(zhu)的9 號(hào)染色體(ti)(Stone et al.,2015)。當(dāng)受到脂肪(fang)酸刺激時(shí),UCP3 基(ji)因表達(dá)量上(shang)調(diào),且(qie)UCP3 蛋白參與脂(zhi)肪酸和其他陰(yin)離子跨(kua)膜轉(zhuǎn)運(yùn)(Lapice et al., 2017)。UCP3 活性對(duì)(dui)脂肪酸氧化和(he)氨基酸代(dai)謝及其相(xiang)關(guān)的(de)生化途徑(jing)具有(you)重要調(diào)(diao)節(jié)作(zuo)用(Aguer et al., 2016)。所以,很多畜(chu)禽研究者(zhe)將其作(zuo)為一個(gè)影響(xiang)肉品質(zhì)的重要(yao)功能候(hou)選基因展開(kai)研究。方美英(ying)等(2002)在對(duì)(dui)豬(Sus scrofa) UCP3 基因多態(tài)(tai)性的研究中,在(zai)內(nèi)含子3 發(fā)現(xiàn)(xian)了T272G變異位點(diǎn)。李(li)艷華等(deng)(2006)分析(xi)了長(zhǎng)白豬(zhu)、杜洛(luo)克等5個(gè)國(guó)內(nèi)(nei)外豬(zhu)種UCP3 基(ji)因的多態(tài)位(wei)點(diǎn),發(fā)(fa)現(xiàn)位(wei)于啟動(dòng)子(zi)區(qū)的SNPs位點(diǎn)會(huì)(hui)造成轉(zhuǎn)(zhuan)錄因(yin)子結(jié)合位(wei)點(diǎn)的改變(bian),影響對(duì)UCP3 基(ji)因的轉(zhuǎn)錄(lu)和調(diào)控(kong),從而影響豬的(de)生產(chǎn)性能。陳(chen)哲(2011)在UCP3 基因(yin)cDNA上檢(jian)測(cè)到A448G突變位點(diǎn)(dian),并發(fā)現(xiàn)(xian)該位點(diǎn)等(deng)位基因(yin)A對(duì)于(yu)改善(shan)豬脂(zhi)肪性狀具(ju)有積極作用。王(wang)陽(yáng)等(2011)研究發(fā)現(xiàn)(xian)UCP3 參與(yu)豬骨骼肌(ji)細(xì)胞脂(zhi)肪代謝的調(diào)節(jié)(jie),從而影響(xiang)地方豬種的肉(rou)質(zhì)和其他性狀(zhuang)。但是(shi)關(guān)于UCP3 基因表達(dá)(da)量與(yu)肉質(zhì)(zhi)性能之間的相(xiang)關(guān)性尚未(wei)見(jiàn)研究報(bào)(bao)道。
? ? ? 本研究以貴(gui)州優(yōu)良(liang)地方品種(zhong)江口蘿卜(bo)豬為實(shí)(shi)驗(yàn)材料,屠(tu)宰后測(cè)定其11 項(xiàng)(xiang)主要肉質(zhì)(zhi)性能指標(biāo),并(bing)提取背最長(zhǎng)肌(ji)中的基因(yin)組DNA建立(li)混合(he)DNA池,擴(kuò)(kuo)增UCP3 基因(yin)全部外(wai)顯子(zi)并測(cè)序,初步篩(shai)選多態(tài)位點(diǎn)(dian),然后以單個(gè)樣(yang)本DNA為模板,擴(kuò)(kuo)增篩選到(dao)的位(wei)點(diǎn)對(duì)(dui)應(yīng)外顯子(zi),用以測(cè)序驗(yàn)證(zheng)并分型。對(duì)應(yīng)肉(rou)質(zhì)指(zhi)標(biāo),對(duì)不同基因(yin)型豬進(jìn)行(xing)肉質(zhì)(zhi)性能差(cha)異分析。提取(qu)背最長(zhǎng)(zhang)肌總(zong)RNA,檢測(cè)不同基(ji)因型江口(kou)蘿卜豬背(bei)最長(zhǎng)肌中UCP3 基(ji)因的平均表達(dá)(da)量做差異(yi)顯著性(xing)分析,分析基因(yin)型、表達(dá)(da)量與及(ji)肉質(zhì)性能三者(zhe)之間的(de)關(guān)聯(lián)(lian)性,以(yi)期探(tan)尋UCP3 基因多態(tài)性(xing)對(duì)江口蘿卜(bo)豬肉質(zhì)性(xing)能的(de)影響,為科學(xué)的(de)選種選育提供(gong)基礎(chǔ)材(cai)料。
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