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江口蘿卜(bo)豬UCP3 基因變(bian)異及其(qi)表達(dá)量與肉質(zhì)(zhi)性狀關(guān)聯(lián)(lian)性分析(xi)
? ? ? 解耦聯(lián)蛋白(uncoupling protein, UCPs)是(shi)線粒體上的(de)質(zhì)子載體,以質(zhì)(zhi)子漏方式(shi)把H+從(cong)外膜傳遞(di)到內(nèi)膜(mo)(Ricquier, Frédéric, 2000)。在氧化磷(lin)酸化過(guò)程中(zhong),可以降低膜(mo)內(nèi)外的(de)電化學(xué)梯(ti)度,在電子(zi)傳遞(di)過(guò)程(cheng)中實(shí)現(xiàn)質(zhì)子回(hui)流,從而起(qi)到讓(rang)呼吸鏈與ATP合成(cheng)過(guò)程解耦聯(lián)的(de)作用,使能量以(yi)熱能(neng)的形式散發(fā),氧(yang)化磷酸化合成(cheng)ATP 的效率下降(張(zhang)雷等(deng), 2010)。UCP3 基因是UCPs 家(jia)族成員之一,與(yu)UCP2 基因緊密連(lian)鎖并定位(wei)于豬的9 號(hào)染色(se)體(Stone et al.,2015)。當(dāng)受(shou)到脂肪酸刺(ci)激時(shí),UCP3 基(ji)因表達(dá)量上調(diào)(diao),且UCP3 蛋白參與脂(zhi)肪酸(suan)和其他陰離(li)子跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)(Lapice et al., 2017)。UCP3 活(huo)性對(duì)脂肪酸氧(yang)化和氨(an)基酸代(dai)謝及其相關(guān)(guan)的生(sheng)化途徑具(ju)有重要(yao)調(diào)節(jié)作用(Aguer et al., 2016)。所(suo)以,很多畜禽(qin)研究者將(jiang)其作(zuo)為一(yi)個(gè)影(ying)響肉品(pin)質(zhì)的重要功(gong)能候選基因(yin)展開(kāi)研究。方美(mei)英等(2002)在對(duì)豬(Sus scrofa) UCP3 基(ji)因多(duo)態(tài)性的研究(jiu)中,在內(nèi)含子3 發(fā)(fa)現(xiàn)了T272G變異位點(diǎn)(dian)。李艷華等(deng)(2006)分析(xi)了長(zhǎng)白(bai)豬、杜洛(luo)克等(deng)5個(gè)國(guó)內(nèi)外豬種(zhong)UCP3 基因的多態(tài)位(wei)點(diǎn),發(fā)現(xiàn)(xian)位于啟(qi)動(dòng)子區(qū)的SNPs位點(diǎn)(dian)會(huì)造成(cheng)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)(jie)合位點(diǎn)(dian)的改變(bian),影響(xiang)對(duì)UCP3 基因的(de)轉(zhuǎn)錄(lu)和調(diào)控,從而(er)影響豬的生產(chǎn)(chan)性能。陳(chen)哲(2011)在UCP3 基(ji)因cDNA上檢測(cè)到(dao)A448G突變位(wei)點(diǎn),并發(fā)現(xiàn)(xian)該位點(diǎn)(dian)等位基(ji)因A對(duì)于改善豬(zhu)脂肪性狀具有(you)積極作用。王(wang)陽(yáng)等(deng)(2011)研究發(fā)現(xiàn)UCP3 參與(yu)豬骨(gu)骼肌(ji)細(xì)胞脂(zhi)肪代謝(xie)的調(diào)節(jié),從而影(ying)響地方豬種(zhong)的肉質(zhì)和其他(ta)性狀。但(dan)是關(guān)于(yu)UCP3 基因表(biao)達(dá)量與肉質(zhì)性(xing)能之(zhi)間的相關(guān)性尚(shang)未見(jiàn)研究報(bào)道(dao)。
? ? ? 本研究以貴州(zhou)優(yōu)良地方品(pin)種江(jiang)口蘿卜豬為(wei)實(shí)驗(yàn)材(cai)料,屠宰后(hou)測(cè)定其11 項(xiàng)(xiang)主要肉質(zhì)性(xing)能指標(biāo),并提(ti)取背最長(zhǎng)肌(ji)中的(de)基因(yin)組DNA建立混(hun)合DNA池,擴(kuò)增UCP3 基因(yin)全部外顯子(zi)并測(cè)(ce)序,初步(bu)篩選多態(tài)位點(diǎn)(dian),然后以單個(gè)(ge)樣本DNA為模(mo)板,擴(kuò)(kuo)增篩(shai)選到的(de)位點(diǎn)對(duì)(dui)應(yīng)外顯子,用以(yi)測(cè)序驗(yàn)(yan)證并分(fen)型。對(duì)應(yīng)肉(rou)質(zhì)指(zhi)標(biāo),對(duì)不(bu)同基(ji)因型豬(zhu)進(jìn)行肉質(zhì)(zhi)性能差異分(fen)析。提取背最長(zhǎng)(zhang)肌總RNA,檢測(cè)不同(tong)基因型江口蘿(luo)卜豬(zhu)背最(zui)長(zhǎng)肌中(zhong)UCP3 基因的平均表(biao)達(dá)量做(zuo)差異顯著性(xing)分析,分(fen)析基因型、表(biao)達(dá)量(liang)與及(ji)肉質(zhì)性能三(san)者之間的(de)關(guān)聯(lián)性(xing),以期(qi)探尋UCP3 基因多(duo)態(tài)性對(duì)(dui)江口蘿卜豬肉(rou)質(zhì)性(xing)能的影(ying)響,為科學(xué)的選(xuan)種選育提供基(ji)礎(chǔ)材料(liao)。
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