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江口蘿卜豬(zhu)UCP3 基因(yin)變異及其表達(dá)(da)量與肉(rou)質(zhì)性狀關(guān)聯(lián)(lian)性分析(xi)
? ? ? 解耦聯(lián)蛋白(uncoupling protein, UCPs)是(shi)線粒體上(shang)的質(zhì)子載體(ti),以質(zhì)子漏方(fang)式把H+從外膜(mo)傳遞到內(nèi)膜(Ricquier, Frédéric, 2000)。在(zai)氧化磷酸化(hua)過(guò)程中,可以降(jiang)低膜內(nèi)外(wai)的電化學(xué)梯(ti)度,在電子傳(chuan)遞過(guò)(guo)程中(zhong)實(shí)現(xiàn)(xian)質(zhì)子回流,從而(er)起到讓(rang)呼吸鏈(lian)與ATP合成過(guò)程(cheng)解耦聯(lián)的作用(yong),使能量以熱能(neng)的形式散發(fā),氧(yang)化磷酸化(hua)合成ATP 的(de)效率下降(張雷(lei)等, 2010)。UCP3 基因(yin)是UCPs 家族成(cheng)員之一,與UCP2 基因(yin)緊密(mi)連鎖并(bing)定位于豬的9 號(hào)(hao)染色(se)體(Stone et al.,2015)。當(dāng)(dang)受到脂肪(fang)酸刺激時(shí),UCP3 基(ji)因表達(dá)量上(shang)調(diào),且UCP3 蛋白(bai)參與脂肪(fang)酸和其他陰(yin)離子跨膜轉(zhuǎn)(zhuan)運(yùn)(Lapice et al., 2017)。UCP3 活性(xing)對(duì)脂肪酸氧化(hua)和氨基(ji)酸代謝及(ji)其相關(guān)的(de)生化途徑(jing)具有重要調(diào)(diao)節(jié)作用(yong)(Aguer et al., 2016)。所以,很多畜(chu)禽研(yan)究者將(jiang)其作為一(yi)個(gè)影(ying)響肉(rou)品質(zhì)的重要功(gong)能候選基因(yin)展開(kāi)研(yan)究。方美英(ying)等(2002)在對(duì)豬(zhu)(Sus scrofa) UCP3 基因多(duo)態(tài)性的研究(jiu)中,在內(nèi)含(han)子3 發(fā)現(xiàn)(xian)了T272G變異(yi)位點(diǎn)。李艷華(hua)等(2006)分析了長(zhǎng)(zhang)白豬(zhu)、杜洛克等5個(gè)(ge)國(guó)內(nèi)(nei)外豬種UCP3 基(ji)因的多態(tài)位點(diǎn)(dian),發(fā)現(xiàn)位于啟(qi)動(dòng)子(zi)區(qū)的SNPs位(wei)點(diǎn)會(huì)造成轉(zhuǎn)(zhuan)錄因(yin)子結(jié)合位點(diǎn)(dian)的改變,影響對(duì)(dui)UCP3 基因的轉(zhuǎn)(zhuan)錄和調(diào)控,從(cong)而影響豬的生(sheng)產(chǎn)性能。陳哲(zhe)(2011)在UCP3 基因cDNA上檢測(cè)(ce)到A448G突變位點(diǎn)(dian),并發(fā)現(xiàn)該位(wei)點(diǎn)等位基因A對(duì)(dui)于改善(shan)豬脂肪性狀(zhuang)具有積極作用(yong)。王陽(yáng)等(2011)研究發(fā)(fa)現(xiàn)UCP3 參與豬骨骼(ge)肌細(xì)(xi)胞脂肪代謝的(de)調(diào)節(jié),從而(er)影響地(di)方豬種的肉質(zhì)(zhi)和其(qi)他性狀(zhuang)。但是關(guān)于(yu)UCP3 基因表達(dá)(da)量與(yu)肉質(zhì)(zhi)性能(neng)之間的相關(guān)(guan)性尚未(wei)見(jiàn)研究報(bào)道(dao)。
? ? ? 本研究以(yi)貴州優(yōu)(you)良地(di)方品種(zhong)江口蘿卜豬為(wei)實(shí)驗(yàn)(yan)材料,屠(tu)宰后測(cè)定(ding)其11 項(xiàng)(xiang)主要(yao)肉質(zhì)性能指標(biāo)(biao),并提取背最長(zhǎng)(zhang)肌中的(de)基因組DNA建(jian)立混合DNA池,擴(kuò)(kuo)增UCP3 基因全部外(wai)顯子并(bing)測(cè)序,初步篩(shai)選多態(tài)位點(diǎn),然(ran)后以單(dan)個(gè)樣本DNA為模(mo)板,擴(kuò)增篩(shai)選到的位(wei)點(diǎn)對(duì)應(yīng)外顯子(zi),用以(yi)測(cè)序驗(yàn)(yan)證并分型。對(duì)(dui)應(yīng)肉質(zhì)指(zhi)標(biāo),對(duì)不同基(ji)因型(xing)豬進(jìn)(jin)行肉(rou)質(zhì)性能差(cha)異分析。提(ti)取背最長(zhǎng)(zhang)肌總(zong)RNA,檢測(cè)不同(tong)基因型江(jiang)口蘿卜豬背(bei)最長(zhǎng)肌中(zhong)UCP3 基因的平均表(biao)達(dá)量做(zuo)差異(yi)顯著性分(fen)析,分析基因(yin)型、表達(dá)量與(yu)及肉質(zhì)(zhi)性能三者(zhe)之間(jian)的關(guān)聯(lián)(lian)性,以期探(tan)尋UCP3 基因多(duo)態(tài)性對(duì)(dui)江口蘿卜豬肉(rou)質(zhì)性能(neng)的影響,為(wei)科學(xué)的(de)選種選育提(ti)供基礎(chǔ)材料(liao)。
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