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江口蘿卜(bo)豬UCP3 基因變異及(ji)其表(biao)達(dá)量與肉(rou)質(zhì)性狀關(guān)聯(lián)(lian)性分析
? ? ? 解耦聯(lián)(lian)蛋白(uncoupling protein, UCPs)是線粒(li)體上(shang)的質(zhì)子載體(ti),以質(zhì)子(zi)漏方式把H+從(cong)外膜傳遞到內(nèi)(nei)膜(Ricquier, Frédéric, 2000)。在氧化磷酸(suan)化過程(cheng)中,可以降低膜(mo)內(nèi)外的電化學(xué)(xue)梯度,在電子(zi)傳遞(di)過程中實(shí)現(xiàn)(xian)質(zhì)子回流(liu),從而起到讓(rang)呼吸(xi)鏈與ATP合成過(guo)程解(jie)耦聯(lián)的作(zuo)用,使能量以熱(re)能的形式散(san)發(fā),氧(yang)化磷酸化合(he)成ATP 的效率(lv)下降(jiang)(張雷(lei)等, 2010)。UCP3 基因是(shi)UCPs 家族成(cheng)員之(zhi)一,與UCP2 基因緊(jin)密連鎖并定(ding)位于豬的(de)9 號(hào)染色(se)體(Stone et al.,2015)。當(dāng)受到脂(zhi)肪酸刺激(ji)時(shí),UCP3 基因表達(dá)量(liang)上調(diào),且UCP3 蛋白參(can)與脂肪酸和其(qi)他陰(yin)離子跨膜(mo)轉(zhuǎn)運(yùn)(Lapice et al., 2017)。UCP3 活性對(duì)脂(zhi)肪酸氧化和(he)氨基酸代謝及(ji)其相關(guān)的(de)生化途徑具(ju)有重要(yao)調(diào)節(jié)作用(Aguer et al., 2016)。所以(yi),很多(duo)畜禽研究(jiu)者將其作(zuo)為一個(gè)影(ying)響肉(rou)品質(zhì)的重(zhong)要功能候選基(ji)因展開研究(jiu)。方美英等(deng)(2002)在對(duì)豬(zhu)(Sus scrofa) UCP3 基因多(duo)態(tài)性的研(yan)究中,在內(nèi)含(han)子3 發(fā)現(xiàn)了T272G變異(yi)位點(diǎn)。李艷(yan)華等(deng)(2006)分析了長(zhǎng)白(bai)豬、杜(du)洛克(ke)等5個(gè)國(guó)內(nèi)外(wai)豬種UCP3 基因的(de)多態(tài)位(wei)點(diǎn),發(fā)現(xiàn)(xian)位于啟動(dòng)子(zi)區(qū)的SNPs位點(diǎn)(dian)會(huì)造成轉(zhuǎn)錄(lu)因子(zi)結(jié)合位點(diǎn)(dian)的改變,影響(xiang)對(duì)UCP3 基因的(de)轉(zhuǎn)錄和調(diào)控(kong),從而影響豬(zhu)的生產(chǎn)(chan)性能。陳哲(zhe)(2011)在UCP3 基(ji)因cDNA上檢測(cè)到A448G突(tu)變位點(diǎn),并(bing)發(fā)現(xiàn)(xian)該位(wei)點(diǎn)等(deng)位基因A對(duì)(dui)于改善豬脂肪(fang)性狀具有(you)積極作用(yong)。王陽(yang)等(2011)研究發(fā)現(xiàn)UCP3 參(can)與豬骨(gu)骼肌細(xì)胞脂(zhi)肪代謝的(de)調(diào)節(jié),從而影響(xiang)地方(fang)豬種的肉質(zhì)和(he)其他性狀(zhuang)。但是關(guān)于(yu)UCP3 基因表達(dá)(da)量與肉質(zhì)性(xing)能之間的(de)相關(guān)性尚(shang)未見研究報(bào)(bao)道。
? ? ? 本研究以貴(gui)州優(yōu)良(liang)地方品種江(jiang)口蘿(luo)卜豬為(wei)實(shí)驗(yàn)材(cai)料,屠(tu)宰后測(cè)定其(qi)11 項(xiàng)主要肉質(zhì)(zhi)性能指標(biāo)(biao),并提取背(bei)最長(zhǎng)肌中的(de)基因組DNA建立混(hun)合DNA池,擴(kuò)增(zeng)UCP3 基因全(quan)部外顯子并測(cè)(ce)序,初步(bu)篩選多態(tài)位點(diǎn)(dian),然后以(yi)單個(gè)樣本(ben)DNA為模(mo)板,擴(kuò)增篩選到(dao)的位點(diǎn)對(duì)應(yīng)外(wai)顯子,用(yong)以測(cè)(ce)序驗(yàn)證并分(fen)型。對(duì)(dui)應(yīng)肉(rou)質(zhì)指(zhi)標(biāo),對(duì)不(bu)同基因型(xing)豬進(jìn)行肉質(zhì)性(xing)能差異分(fen)析。提取背最(zui)長(zhǎng)肌總(zong)RNA,檢測(cè)不同基因(yin)型江口蘿卜(bo)豬背最長(zhǎng)肌中(zhong)UCP3 基因的(de)平均表達(dá)量做(zuo)差異(yi)顯著(zhu)性分(fen)析,分析(xi)基因型(xing)、表達(dá)量與及肉(rou)質(zhì)性能三(san)者之間(jian)的關(guān)聯(lián)性(xing),以期探尋UCP3 基因(yin)多態(tài)性對(duì)(dui)江口蘿卜豬肉(rou)質(zhì)性能的影響(xiang),為科學(xué)的(de)選種選育(yu)提供基礎(chǔ)材料(liao)。
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