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江口(kou)蘿卜豬UCP3 基因(yin)變異(yi)及其表達(dá)量與(yu)肉質(zhì)(zhi)性狀關(guān)(guan)聯(lián)性分(fen)析
? ? ? 解耦聯(lián)蛋白(bai)(uncoupling protein, UCPs)是線粒(li)體上的質(zhì)(zhi)子載體,以(yi)質(zhì)子漏(lou)方式把H+從(cong)外膜傳遞(di)到內(nèi)膜(Ricquier, Frédéric, 2000)。在(zai)氧化磷酸化過(guò)(guo)程中,可(ke)以降低膜內(nèi)(nei)外的電化學(xué)梯(ti)度,在電子傳遞(di)過(guò)程(cheng)中實(shí)現(xiàn)質(zhì)(zhi)子回流,從而(er)起到(dao)讓呼(hu)吸鏈與ATP合(he)成過(guò)(guo)程解耦聯(lián)的(de)作用,使能(neng)量以熱能(neng)的形式(shi)散發(fā),氧(yang)化磷酸化合(he)成ATP 的效率下(xia)降(張雷等, 2010)。UCP3 基(ji)因是UCPs 家(jia)族成員之一,與(yu)UCP2 基因緊(jin)密連鎖(suo)并定位于豬(zhu)的9 號(hào)染色體(ti)(Stone et al.,2015)。當(dāng)受到脂肪酸(suan)刺激時(shí),UCP3 基因(yin)表達(dá)量上調(diào),且(qie)UCP3 蛋白參與脂肪(fang)酸和其(qi)他陰離子(zi)跨膜(mo)轉(zhuǎn)運(yùn)(Lapice et al., 2017)。UCP3 活性對(duì)脂(zhi)肪酸(suan)氧化和氨基酸(suan)代謝及(ji)其相關(guān)的生(sheng)化途徑具有重(zhong)要調(diào)節(jié)(jie)作用(Aguer et al., 2016)。所以,很多(duo)畜禽研究者(zhe)將其作為(wei)一個(gè)影響肉(rou)品質(zhì)的重(zhong)要功能(neng)候選基因展開(kāi)(kai)研究。方美(mei)英等(deng)(2002)在對(duì)豬(zhu)(Sus scrofa) UCP3 基因多態(tài)(tai)性的研究中(zhong),在內(nèi)含子(zi)3 發(fā)現(xiàn)了(le)T272G變異位點(diǎn)(dian)。李艷華(hua)等(2006)分析(xi)了長(zhǎng)(zhang)白豬、杜洛(luo)克等5個(gè)國(guó)(guo)內(nèi)外豬種(zhong)UCP3 基因的多態(tài)位(wei)點(diǎn),發(fā)現(xiàn)位于啟(qi)動(dòng)子(zi)區(qū)的(de)SNPs位點(diǎn)會(huì)造(zao)成轉(zhuǎn)(zhuan)錄因子結(jié)合(he)位點(diǎn)的(de)改變(bian),影響對(duì)UCP3 基(ji)因的轉(zhuǎn)錄(lu)和調(diào)(diao)控,從而(er)影響豬的生產(chǎn)(chan)性能。陳哲(2011)在(zai)UCP3 基因cDNA上檢測(cè)(ce)到A448G突變位點(diǎn)(dian),并發(fā)現(xiàn)該(gai)位點(diǎn)(dian)等位(wei)基因A對(duì)(dui)于改善豬脂肪(fang)性狀具有積極(ji)作用。王陽(yáng)等(deng)(2011)研究發(fā)(fa)現(xiàn)UCP3 參與豬骨(gu)骼肌細(xì)(xi)胞脂肪代謝(xie)的調(diào)節(jié),從而影(ying)響地方豬(zhu)種的肉(rou)質(zhì)和(he)其他性狀(zhuang)。但是(shi)關(guān)于UCP3 基因表(biao)達(dá)量與(yu)肉質(zhì)性(xing)能之間的相關(guān)(guan)性尚未見(jiàn)研(yan)究報(bào)道。
? ? ? 本研究以貴州(zhou)優(yōu)良地方品種(zhong)江口(kou)蘿卜豬為實(shí)(shi)驗(yàn)材料,屠宰(zai)后測(cè)(ce)定其11 項(xiàng)(xiang)主要肉質(zhì)(zhi)性能指標(biāo)(biao),并提取背最(zui)長(zhǎng)肌中(zhong)的基因組(zu)DNA建立混合(he)DNA池,擴(kuò)(kuo)增UCP3 基因全部(bu)外顯子(zi)并測(cè)序,初(chu)步篩選(xuan)多態(tài)位點(diǎn)(dian),然后以(yi)單個(gè)樣本DNA為(wei)模板,擴(kuò)增(zeng)篩選到的(de)位點(diǎn)對(duì)應(yīng)外(wai)顯子,用以測(cè)(ce)序驗(yàn)證并分(fen)型。對(duì)應(yīng)肉(rou)質(zhì)指標(biāo),對(duì)(dui)不同基因型(xing)豬進(jìn)(jin)行肉質(zhì)(zhi)性能差異(yi)分析。提取背(bei)最長(zhǎng)(zhang)肌總RNA,檢(jian)測(cè)不同(tong)基因型(xing)江口蘿(luo)卜豬(zhu)背最長(zhǎng)肌中(zhong)UCP3 基因的平均表(biao)達(dá)量做差異顯(xian)著性分析,分(fen)析基(ji)因型、表達(dá)(da)量與及肉質(zhì)(zhi)性能三者之間(jian)的關(guān)聯(lián)性(xing),以期(qi)探尋UCP3 基因多(duo)態(tài)性對(duì)(dui)江口(kou)蘿卜豬(zhu)肉質(zhì)性能的(de)影響,為科(ke)學(xué)的選(xuan)種選育提供(gong)基礎(chǔ)(chu)材料。
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